Аннотация и пояснение.

Пробиотическая минерально-углеводная кормовая добавка Сорболин - это пробиотик Олин, в состав которого добавили сорбент трепел. Полученные данные исследования можно отнести и к пробиотику Олин

Пробиотическая минерально-углеводная кормовая добавка Сорболин (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) обладает высокой антибактериальной, фунгицидной и противопаразитарной активностью in vitro в отношении микроорганизмов, вызывающих кишечные инфекции у телят.

Через 6 часов бульонные культуры эшерихий, сальмонелл, псевдомонад и стафилококков погибают после добавления к ним Сорболина в соотношении объемов препарата и бульонной культуры 1:5.
При определении фунгицидной активности Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) в отношении плесневых грибов – продуцентов микотоксинов, было установлено, что через 24 ч воздействия Сорболина на культуру аспергилл, их количество уменьшалось в 17766 раз.
При определении противопаразитарной активности Сорболина in vitro в отношении эймерий было установлено, что препарат обладает кокцидиостатическим действием при экспозиции 60 мин и соотношении препарата и суспензии паразитов 1:1. При обработке суспензии эймерий Сорболином, их количество уменьшилось в 3 раза по сравнению с контролем.
Сорболин может быть рекомендован для широких производственных испытаний при сальмонеллезе, эшерихиозе, стафилококкозе, псевдомонозе, микотоксикозах и эймериозе (кокцидиозе) телят.

Проблема желудочно-кишечных болезней крупного рогатого скота, вызываемых бактериями, грибами, микотоксинами и кокцидиями, до сих пор не решена, несмотря на большое разнообразие антибиотиков, пробиотиков, энтеросорбентов и кокцидиостатиков, представленных на рынке ветеринарных препаратов [1].
Желудочно-кишечные болезни крупного рогатого скота приносят огромный ущерб скотоводству, так как антибиотики и кокцидиостатики оказываются недостаточно эффективны, а диагностика кишечных инфекций и микотоксикозов затруднена [2].
В некоторых хозяйствах падеж телят от бактериальной и грибной микрофлоры достигает 70%. У новотельных коров кишечные инфекции провоцируют смещение сычуга, перитониты, маститы и эндометриты.
В зимне-весенний период у крупного рогатого скота повсеместно наблюдаются микотоксикозы, которые обуславливают рождение слабого или нежизнеспособного потомства.
В последние годы у телят все чаще стали диагностировать эймериоз, а кокцидионосительство у коров и нетелей в различных климатических зонах Российской Федерации достигает 30–50% [3].

Поэтому разработка и внедрение в ветеринарную практику новых универсальных препаратов против желудочно-кишечных болезней крупного рогатого скота, обладающих широким спектром антимикробного действия в отношении бактерий и грибов, являющихся эффективными энтеросорбентами микотоксинов и активно подавляющими рост и размножение кокцидий, является актуальной задачей для экономики страны.

Цель исследования. Определить антимикробную активность Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) in vitro в отношении эшерихий, сальмонелл, стафилококков, псевдомонад, аспергилл и эймерий, вызывающих кишечные инфекции у телят.

Материалы и методы исследований. Антибактериальную и противогрибную активность Сорболина определяли в отношении бактерий E. coli, S. dublin, S. aureus и
P. aeruginosa и плесневого гриба A. niger. Для изучения бактерицидного и фунгицидного действия Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) использовали бульонные культуры бактерий и грибов. Бактерии культивировали в МПБ, грибы – в бульоне Сабуро.
В каждую пробирку вносили по 5 мл бульонной культуры определенных видов бактерий с содержанием 2 млрд микробных клеток в 1 мл и добавляли по 1, 3 и 5 мл суспензии Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел), разведенной физиологическим раствором.
Содержимое пробирок тщательно перемешивали и выдерживали в термостате при температуре +37 ºС в течение суток. Через 2, 6, 12 и 24 часа экспозиции из содержимого пробирок делали посев на МПА и через сутки инкубирования в термостате подсчитывали количество выросших колоний бактерий. В качестве контроля использовали бактериальные суспензии, в которые вносили вместо Сорболина аналогично физраствор.
Аспергиллы культивировали на агаре Сабуро в течение 14 суток, затем смывали воздушный мицелий бульоном Сабуро и определяли количество спор грибов в суспензии методом высева на агар Сабуро. При подсчете колоний через 7 дней было установлено количество аспергилл в 1 мл бульонной суспензии, равное 3,5×105 КОЕ (эта цифра условна, потому что подсчитать количество грибов затруднительно, так как они размножаются не только спорами, но и мицелием).
Затем отмеряли в пробирки по 5 мл бульонной культуры аспергилл и в каждую пробирку с грибами вносили по 1, 3 и 5 мл суспензии Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел). Через 24 часа, 5, 10 и 14 суток культивирования грибов при комнатной температуре в присутствии Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) отбирали содержимое пробирок и делали посев на агар Сабуро. Результаты учитывали ежедневно в течение 14 суток при выдерживании чашек с посевами аспергилл при комнатной температуре. В качестве контроля использовали аналогичную грибную бульонную культуру, в которую вместо Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) вносили физраствор.
Для изучения противопаразитарной активности Сорболина (пробиотик Олин, в составе которого присутствует трепел) в отношении эймерий из неблагополучного по эймериозу хозяйства на кафедру микробиологии были доставлены участки толстого отдела кишечника от трех павших телят в возрасте 1 месяца с клиническими признаками эймериоза (понос с прожилками крови, вздутие живота).
После проведения микробиологических исследований содержимого толстого отдела кишечника павших животных был диагностирован эймериоз (кокцидиоз).
Из кишечного содержимого павших телят методом Фюллеборна были выделены эймерии в количестве (22±3) штук в 1 г фекалий.
Была приготовлена концентрированная суспензия эймерий, которую хранили в холодильнике при температуре +4 °С и использовали в процессе работы. В суспензию эймерий вносили разведенный физраствором Сорболин в соотношениях 1:1 к объему суспензии и выдерживали в термостате при температуре +37 °С в течение 60 мин. Затем в 10 полях зрения микроскопа подсчитывали количество живых эймерий. В качестве контроля вместо Сорболина использовали водопроводную воду.
Все исследования проводили в трехкратной повторности.
Результаты исследований. Результаты исследований антибактериальной активности Сорболина представлены на рис. 1.

Было установлено, что антимикробная активность Сорболина находилась в прямой зависимости от объемного соотношения препарата и бактериальной суспензии, а также от времени воздействия Сорболина на бактерии: чем больше суспензии Сорболина было внесено в бульонную культуру бактерий и чем длительнее биологически активные компоненты препарата воздействовали на микроорганизмы, тем более эффективно проявлялось антимикробное действие Сорболина.
Как следует из рис. 1, через 2 часа воздействия Сорболина на бульонную культуру выживали единичные бактерии E. coli, S. dublin и P. aeruginosa, а через 6 часов эшерихии, сальмонеллы и синегнойная палочка из суспензии не высевались. S. aureus был наименее устойчив к воздействию Сорболина и через 2 часа вся бульонная культура золотистого стафилококка погибала.
Во всех случаях из бульонных культур выделяли бациллы-компоненты Сорболина в высокой концентрации. В контрольных пробах отмечался бурный рост микроорганизмов.
Таким образом, Сорболин обладает высокой антибактериальной активностью и через 6 часов бульонные культуры эшерихий, сальмонелл, псевдомонад и стафилококков погибают после добавления к ним Сорболина в соотношении объемов препарата и бульонной культуры 1:5.
При определении фунгицидной активности Сорболина в отношении плесневых грибов, продуцентов микотоксинов было установлено, что через 24 часа воздействия 1 мл Сорболина на культуру гриба аспергиллы не погибали, однако их концентрация уменьшилась в 6295 раз, в сравнении с их количеством до постановки опыта. При добавлении в культуру аспергилл 3 и 5 мл Сорболина через 24 ч инкубирования концентрация грибов уменьшилась в 15 625 и в 17 766 раз, соответственно (рис. 2).

Сорболин проявляет высокую фунгицидную активность в отношении аспергилл уже через 24 часа воздействия на грибную бульонную культуру, через 5 суток аспергиллы в суспензии не обнаруживаются.
При определении  противопаразитарной активности Сорболина in vitro в отношении эймерий было установлено, что препарат обладает кокцидиостатическим действием при экспозиции 60 мин. и соотношении препарата и суспензии паразитов 1:1 (табл. 1).

При обработке суспензии эймерий Сорболином их количество уменьшилось в 3 раза по сравнению с контролем. В опытной пробе в 5 полях зрения микроскопа из 10 эймерии не обнаруживались, в то время как в контрольной пробе они обнаруживались в каждом поле зрения микроскопа.
Заключение. На основании проведенных исследований можно заключить, что пробиотическая минерально-углеводная кормовая добавка «Сорболин» обладает высокой антибактериальной, фунгицидной и противопаразитарной активностью in vitro и может быть рекомендована для широких производственных испытаний при сальмонеллезе, эшерихиозе, стафилококкозе, псевдомонозе, микотоксикозах и эймериозе (кокцидиозе) телят.

Литература
1.   Гамидов М. Цеолиты – эффективная кормовая добавка при выращивании телят // Молочное и мясное скотоводство. 2002. № 6. С. 18, 19.
2.   Иванов А. В., Тремасов М. Я., Папуниди К. Х. О проблеме микотоксикозов в животноводстве // Актуальные проблемы ветеринарной медицины. 2010. № 5. С. 194–202.
3.   Липатникова И. А., Решетников В. И. Разработка состава геля Полисорба и его биофармацевтическая оценка // Фармация. 2004. № 3. С. 34, 35.